Протокол окраски по Массону

[Даниил]

Здравствуте! Ребят не могли бы написать протокол окраски по Массону, хотелось бы такой по которому вы сами красили, так сказать проверенный. Заранее спасибо)

[_27_region_]

Здравствуте! Ребят не могли бы написать протокол окраски по Массону, хотелось бы такой по которому вы сами красили, так сказать проверенный. Заранее спасибо)

Привет, Даниил! В нашем ПАО "Перинатального центра", где я работаю, применяем такой набор "БиоВитрум" для окраски по Массону-Фонтана.

 

Набор для окраски по Массону-Фонтана.

 

Реактивы:

A. Аммиачный раствор серебра, 30 мл;

B. Раствор перманганата калия, 18 мл;

C. Активирующий кислотный буфер, 18 мл;

D. Раствор щавелевой кислоты, 30 мл;

E. Раствор тиосульфата натрия, 30 мл;

F. Кармалюм по Майеру, 30 мл.

 

Применение.

Рекомендован для выявления меланина в тканях. В основе метода лежит аргентаффинная реакция - ряд тканевых компонентов обладает способностью восстанавливать серебро из аммиачного раствора до металлического серебра. С целью исключения ложно положительных результатов в набор включены реактивы для депигментации меланина (отбеливатель Маллори). Депигментация должна быть осуществлена на контрольном образце до начала импрегнации серебром.

 

Внимание: фиксаторы, содержащие в своем составе соли тяжелых металлов (хлорид ртути, дихромат калия), которые могут провоцировать ложно положительные результаты; для промывки препаратов использовать только дистиллированную воду; использовать особо чистую стеклянную посуду.

 

Описание метода окраски:

- Поместить 2 среза одного препарата в дистиллированную воду;

- Выбрать контрольный срез;

- Нанести на контрольный срез 10 капель реактива В и 10 капель реактива С, оставить на 20 мин, затем промыть дист.водой;

- Нанести на контрольный срез 10 капель реактива D, оставить на 5 мин, затем промыть дист.водой;

- Окрашивание препарата можно проводить и в стаканчике без изменения времени окрашивания. В таком случае реагент можно сохранить для последующего использования;

- Приготовить инкубационный контейнер и положить туда 2 стекла (срез и контрольный срез), нанести на срез 10 капель реактива А и закрыть инкубационный контейнер, оставить на ночь;

- Промыть срезы в дист.воде и нанести на срез 10 капель реактива Е, оставить на 5 мин;

- Промыть срезы в дист.воде;

- Нанести на контрольный и опытный срез 10 капель реактива F, оставить на 10 мин;

- Промыть срезы в дист.воде;

- Дегидрировать в спиртах возрастающей концентрации, просветлить в ксилоле и заключить под покровное стекло.

 

Результаты:

Скопления меланина - черные в опытном образце, в контроле отсутствуют (наличие в образцах черных преципитатов является ложноположительным результатом).

Ядра - красные.

 

К сожалению, я не пробовала этим набором окрашивать срезы, а так бы выложила фото.