Перейти к содержанию
Forensic medical forum
Судебно-медицинский форум
Авторизация  
Kvaker

SUDAN III - читать гистологам

Рекомендуемые сообщения

Добрый день, обращаюсь к гистологам.

Раньше мы готовили ацетоновый судан из порошка 30-ти летней давности (50 мл. 70% спирта + 50 мл. ацетона) +0,5 г. Судана - готово через 3 дня. Порошок закончился.....

Получили новый порошок судана, а он не красит по ацетоновой технологии.

Кто пробовал приготовить насыщеный р-ор на 70% спирте? (0,3 г. судана на 100 мл. 70% спирта кипятить в водяной бане)

Кто и как готовит Судан? Какие результаты лучше?

 

поделитесь опытом

 

кстати - готовый (покупной) р-ор тоже не красит как надо....

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение
Поделиться на другие сайты

Мы пользуемся суданом 3 на 70% спирту.

Со слов лаборанта есть несколько тонкостей, например плотность раствора судана и плотность спирта для промывки должны быть одинаковыми, иначе клеточные структуры будут лопаться.

как готовить раствор судана в литературе по гист. технике достаточно подробно описано. например Г.А. Меркулов " Курс патогистологической техники"Ленинград 1961. ст194.

Несколько методов из методичке из нашей республики"

"МЕТОДИКА ОКРАСКИ СУДАНОМ III (IV)

 

 

I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

35]
·
Выявление жиров и липидов

 

 

II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

35]
Ø
Судан
III (IV)
35]
Ø
Гематоксилин
35]
Ø
Спирт этиловый 50 – 70%
35]
Ø
Квасцы алюмо-калиевые
35]
Ø
Гематоксилин
35]
Ø
Глицерин
35]
Ø
Калий йодноватокислый
35]
Ø
Глицерин – желатина
35]

 

 

III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

05]
1. НАСЫЩЕННЫЙ РАСТВОР СУДАНА
III (
IV)

 

 

– судан III(IV) 0,2 – 0,3 г;

– спирт этиловый 70% 100,0 мл;

помещают в термостат на 3-5 часов при t 50-600;

охлаждают, фильтруют.

05]
05]
2. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА

 

 

– желатина 1 часть;

– вода дистиллированная 6 частей;

набухает 1-2 часа;

– чистый глицерин 6 частей;

– фенол 0,1 часть;

растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

 

IV. ИЗГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

 

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы

 

Красители

 

Время

 

1

 

 

 

Вода водопроводная

1 – 2 мин

 

2

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин

 

3

 

 

 

СУДАНIII (IV)

20 – 30 мин

 

4

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин

 

5

 

 

 

Вода водопроводная

10 – 30 мин

 

6

 

 

 

ГЕМАТОКСИЛИН

3 мин

 

7

 

 

 

Вода водопроводная

3 –5 мин

 

8

 

 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ

 

VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

35]
·
Жир и жироподобные вещества – от оранжевого до оранжево-красного цвета.
35]
·
Ядра клеток – синего цвета.

 

 

МЕТОДИКА ОКРАСКИ СУДАНОМ III (IV)

(по Гольдману)

 

 

 

I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

35]
·
Выявление жиров и липидов

 

 

II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

35]
Ø
Судан
III (IV)
35]
Ø
Альфа-нафтол
35]
Ø
Гематоксилин
35]
Ø
Спирт этиловый 96%
35]
Ø
К
васцы алюмо-калиевые
35]
Ø
Гематоксилин
35]
Ø
Глицерин
35]
Ø
Калий йодноватокислый
35]
Ø
Глицерин – желатина
35]

 

 

III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

 

1. СУДАНIII (IV)

– судан III (IV) 0,5 – 0,6 г;

– альфа-нафтол 1,2 г;

– спирт этиловый 96% 70,0 мл;

– вода дистиллированная 50,0 мл;

кипятят через асбестовую пластинку или на водяной бане 3-5 мин;

приготовленный раствор – опалесцирующая или мутная жидкость от карминово – до оранжево-красного цвета.

2. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА

– желатина 1 часть;

– вода дистиллированная 6 частей;

набухает 1-2 часа;

– чистый глицерин 6 частей;

– фенол 0,1 часть;

растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

 

IV. ИЗГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

 

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы

 

Красители

 

Время

 

1

 

 

 

Вода водопроводная

1 – 2 мин

 

2

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин

 

3

 

 

 

СУДАНIII (IV)

20 – 30 мин

 

 

 

1

 

2

 

3

 

4

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин

 

5

 

 

 

Вода водопроводная

10 – 30 мин

 

6

 

 

 

ГЕМАТОКСИЛИН

3 мин

 

7

 

 

 

Вода водопроводная

3 –5 мин

 

8

 

 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ

 

 

 

VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

35]
·
Жир и жироподобные вещества – от оранжевого до оранжево-красного цвета.

· ядра клеток – синего цвета.

МЕТОДИКА ОКРАСКИ

СУДАНОМ ЧЕРНЫМ «В»

 

 

I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

525]
·
Выявление жиров и липидов
525]
·
Выявление фосфолипидов

 

 

II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

Ø
Судан черный «В»
Ø
Кармин
Ø
Спирт этиловый 50 – 70%
Ø
Квасцы калийные или аммиачные
Ø
Глицерин – желатина
325]

 

 

III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

075]
1. СУДАН ЧЕРНЫЙ «В»

 

 

– судан черный «В» 0,1- 0,2 г

– спирт этиловый 70% 100,0 мл;

нагревают до кипения, охлаждают, фильтруют.

 

2. КАРМИН КВАСЦОВЫЙ

– квасцы калийные или аммиачные 5,0 г;

– вода дистиллированная 100,0 мл;

– кармин 1,0 г;

кипятят в колбе через асбестовую пластинку 20-30 мин;

охлаждают, фильтруют.

05]
05]
3. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА

 

 

– желатина 1 часть;

– вода дистиллированная 6 частей;

набухает 1-2 часа;

– чистый глицерин 6 частей;

– фенол 0,1 часть;

растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

 

IV. ИГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

 

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы

 

Красители

 

Время

 

1

 

 

 

Вода водопроводная

1 – 2 мин

 

2

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

0,5 – 1 мин

 

3

 

 

 

СУДАН ЧЕРНЫЙ «В»

5 – 30 мин

 

1

 

2

 

3

 

4

 

 

 

СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

0,5 – 1 мин

 

5

 

 

 

Вода водопроводная

10 – 20 мин

 

6

 

 

 

КАРМИН КВАСЦОВЫЙ

5 мин

 

7

 

 

 

Вода водопроводная

5 – 10 мин

 

8

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ

 

 

 

 

 

VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

6]
·
Жир и жироподобные вещества – темно-синего или черного цвета.
575]
Изменено пользователем Aklim

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение
Поделиться на другие сайты

Для публикации сообщений создайте учётную запись или авторизуйтесь

Вы должны быть пользователем, чтобы оставить комментарий

Создать учетную запись

Зарегистрируйте новую учётную запись в нашем сообществе. Это очень просто!

Регистрация нового пользователя

Войти

Уже есть аккаунт? Войти в систему.

Войти
Авторизация  



×