Перейти к содержимому

Судебно-медицинский форум forens.ru

Forensic medical forum

Судебно-медицинский форум

SUDAN III - читать гистологам



Сообщений в теме: 2

#1 Kvaker Отправлено 13 Июнь 2013 - 09:36

  • K
  • 275 сообщений
Добрый день, обращаюсь к гистологам.
Раньше мы готовили ацетоновый судан из порошка 30-ти летней давности (50 мл. 70% спирта + 50 мл. ацетона) +0,5 г. Судана - готово через 3 дня. Порошок закончился.....
Получили новый порошок судана, а он не красит по ацетоновой технологии.
Кто пробовал приготовить насыщеный р-ор на 70% спирте? (0,3 г. судана на 100 мл. 70% спирта кипятить в водяной бане)
Кто и как готовит Судан? Какие результаты лучше?

поделитесь опытом

кстати - готовый (покупной) р-ор тоже не красит как надо....

реклама

#2 Aklim Отправлено 13 Июнь 2013 - 13:16

  • K
  • 287 сообщений
Мы пользуемся суданом 3 на 70% спирту.
Со слов лаборанта есть несколько тонкостей, например плотность раствора судана и плотность спирта для промывки должны быть одинаковыми, иначе клеточные структуры будут лопаться.
как готовить раствор судана в литературе по гист. технике достаточно подробно описано. например Г.А. Меркулов " Курс патогистологической техники"Ленинград 1961. ст194.
Несколько методов из методичке из нашей республики"

"МЕТОДИКА ОКРАСКИ СУДАНОМ III (IV)




I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

35]· Выявление жиров и липидов




II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

35]Ø Судан III (IV)

35]Ø Гематоксилин

35]Ø Спирт этиловый 50 – 70%

35]Ø Квасцы алюмо-калиевые

35]Ø Гематоксилин

35]Ø Глицерин

35]Ø Калий йодноватокислый

35]Ø Глицерин – желатина

35]




III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

05]1. НАСЫЩЕННЫЙ РАСТВОР СУДАНАIII (IV)




– судан III(IV) 0,2 – 0,3 г;
– спирт этиловый 70% 100,0 мл;
помещают в термостат на 3-5 часов при t 50-600;
охлаждают, фильтруют.

05]

05]2. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА




– желатина 1 часть;
– вода дистиллированная 6 частей;
набухает 1-2 часа;
– чистый глицерин 6 частей;
– фенол 0,1 часть;
растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

IV. ИЗГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы



Красители



Время



1





Вода водопроводная

1 – 2 мин



2





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин



3





СУДАНIII (IV)

20 – 30 мин



4





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин



5





Вода водопроводная

10 – 30 мин



6





ГЕМАТОКСИЛИН

3 мин



7





Вода водопроводная

3 –5 мин



8





ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ

VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

35]· Жир и жироподобные вещества – от оранжевого до оранжево-красного цвета.

35]· Ядра клеток – синего цвета.




МЕТОДИКА ОКРАСКИ СУДАНОМ III (IV)

(по Гольдману)





I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

35]· Выявление жиров и липидов




II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

35]Ø Судан III (IV)

35]Ø Альфа-нафтол

35]Ø Гематоксилин

35]Ø Спирт этиловый 96%

35]Ø Квасцы алюмо-калиевые

35]Ø Гематоксилин

35]Ø Глицерин

35]Ø Калий йодноватокислый

35]Ø Глицерин – желатина

35]




III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

1. СУДАНIII (IV)
– судан III (IV) 0,5 – 0,6 г;
– альфа-нафтол 1,2 г;
– спирт этиловый 96% 70,0 мл;
– вода дистиллированная 50,0 мл;
кипятят через асбестовую пластинку или на водяной бане 3-5 мин;
приготовленный раствор – опалесцирующая или мутная жидкость от карминово – до оранжево-красного цвета.

2. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА
– желатина 1 часть;
– вода дистиллированная 6 частей;
набухает 1-2 часа;
– чистый глицерин 6 частей;
– фенол 0,1 часть;
растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

IV. ИЗГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы



Красители



Время



1





Вода водопроводная

1 – 2 мин



2





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин



3





СУДАНIII (IV)

20 – 30 мин





1



2



3



4





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

1 мин



5





Вода водопроводная

10 – 30 мин



6





ГЕМАТОКСИЛИН

3 мин



7





Вода водопроводная

3 –5 мин



8





ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ



VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

35]· Жир и жироподобные вещества – от оранжевого до оранжево-красного цвета.

· ядра клеток – синего цвета.

МЕТОДИКА ОКРАСКИ

СУДАНОМ ЧЕРНЫМ «В»




I.ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

525]· Выявление жиров и липидов

525]· Выявление фосфолипидов




II. ПЕРЕЧЕНЬ РЕАГЕНТОВ

Ø Судан черный «В»

Ø Кармин

Ø Спирт этиловый 50 – 70%

Ø Квасцы калийные или аммиачные

Ø Глицерин – желатина

325]




III. Приготовление РАСТВОРОВ красителей

075]1. СУДАН ЧЕРНЫЙ «В»




– судан черный «В» 0,1- 0,2 г
– спирт этиловый 70% 100,0 мл;
нагревают до кипения, охлаждают, фильтруют.

2. КАРМИН КВАСЦОВЫЙ
– квасцы калийные или аммиачные 5,0 г;
– вода дистиллированная 100,0 мл;
– кармин 1,0 г;
кипятят в колбе через асбестовую пластинку 20-30 мин;
охлаждают, фильтруют.

05]

05]3. ГЛИЦЕРИН – ЖЕЛАТИНА




– желатина 1 часть;
– вода дистиллированная 6 частей;
набухает 1-2 часа;
– чистый глицерин 6 частей;
– фенол 0,1 часть;
растворяют при нагревании, не доводя до кипения.

IV. ИГОТОВЛЕНИЕ СРЕЗОВ НА ЗАМОРАЖИВАЮЩЕМ МИКРОТОМЕ

V. МЕТОДИКА ОКРАСКИ

Этапы



Красители



Время



1





Вода водопроводная

1 – 2 мин



2





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

0,5 – 1 мин



3





СУДАН ЧЕРНЫЙ «В»

5 – 30 мин



1



2



3



4





СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ50 - 70 %

0,5 – 1 мин



5





Вода водопроводная

10 – 20 мин



6





КАРМИН КВАСЦОВЫЙ

5 мин



7





Вода водопроводная

5 – 10 мин



8



ЗАКЛЮЧЕНИЕ В ГЛИЦЕРИН–ЖЕЛАТИНУ







VI. РЕЗУЛЬТАТ ОКРАСКИ

6]· Жир и жироподобные вещества – темно-синего или черного цвета.

575]


Сообщение отредактировал Aklim: 13 Июнь 2013 - 13:30


#3 Kvaker Отправлено 21 Июнь 2013 - 08:12

  • K
  • 275 сообщений
Спасибо!



Сообщество русскоговорящих судебно-медицинских экспертов
Community of Russian-speaking forensic medical experts
© 2006-2017 Forens.ru